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大鼠端粒酶(TE)ELISA试剂盒实验原理与操作步骤

发表时间:2024-01-19
大鼠端粒酶(TE)ELISA试剂盒的实验原理是利用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体。往包被抗TE抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗大鼠TE抗体、HRP标记的亲和素。经过彻底洗涤后用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的TE呈正相关,通过酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),可以计算出样品浓度。

具体操作步骤如下:

1. 准备所需的试剂和样品,确保试剂盒处于保质期内。
2. 将特异性抗原与固相载体联结,形成固相抗原。洗涤除去未结合的抗原及杂质。
3. 加稀释的样本,保温反应。样本中的特异抗体与固相抗原结合,形成固相抗原抗体复合物。经洗涤后,固相载体上的酶量与样本中受检抗体的量正相关。
4. 加酶标抗抗体。固相免疫复合物中的抗体与酶标抗抗体结合,从而间接地标记上酶。洗涤后,固相载体上的酶量与样本中受检抗体的量正相关。
5. 加底物显色。标本中抗原量含量愈多,结合在固相上的酶标抗原愈少,最后的显色也愈浅。
6. 终止反应,通过酶标仪检测各孔的光密度值(OD值),计算出各样本的浓度。

以上是大鼠端粒酶(TE)ELISA试剂盒的实验原理和操作步骤,仅供参考。实际操作时需严格按照试剂盒说明书进行,以确保实验结果的准确性和可靠性。